date:2023-09-07 16:14:47
樣品制備
步驟
ibidi傷口愈合/劃痕實驗的傷口間隙是通過使用ibidi Culture-Inserts插件產生的,由于確定的無細胞間隙的大小,這保證了極高的再現性。在合適的細胞培養容器中選擇合適的插件。接種和培養細胞,直到它們形成光學融合的單層。讓細胞生長大約24小時。如有必要,用增殖抑制劑處理細胞,然后移除插件以產生間隙。
ibidi解決方案
ibidi開發的傷口愈合產品,設計精巧,操作簡單,標準化的數據分析方法恰恰彌補了傳統實驗方法的不足。ibidi設計了一種雙孔的硅膠插件,可以放在培養皿或孔板中,插件兩孔間的孔壁寬度為500μm。將細胞種在插件中,等待細胞貼壁長滿后,將插件移除,這樣,兩孔間的縫隙就是一個無細胞的“劃痕”。由于是制式的插件,所以兩孔間的縫隙寬度是均一的500μm。整個實驗步驟非常簡單。
結果簡單明了,重復性好,高質量的底部材質,使得成像效果極佳。配套ibidi傷口愈合分析軟件,幾分鐘就能得到測量結果。
ibidi Culture-Insert 2孔 /3孔 / 4孔插件可用于傷口愈合、遷移、2D侵襲測定和細胞的共培養的,具有無細胞確定間隙的硅膠插件。ibidi有25個/盒的單獨插件(實驗人員可自行插入實驗容器中),也有將插件預置在µ-Dish 35mm培養皿中的,為您提供快速而簡單的實驗設置。
Culture-Inserts 插件中最小和標準的傷口尺寸是 500 µm。 Culture-Insert 4 Well /4孔插件會有一個額外的中心間隙,傷口大小為 1000 µm。
即用型ibidi Culture-Insert 2 Well 24預置2孔插件的24孔板,可用于經濟高效的高通量測定。
ibidi µ-Slide 2 Well 2孔腔室載玻片含2個具有理想尺寸的孔,可用于插入插件。
活細胞成像
步驟
在大多數情況下,應在間隙產生后立即使用相差顯微鏡對細胞進行監測。可以在不同的時間點拍攝間隙的照片(例如,在6和12小時之后)或進行活細胞成像。通常,監測細胞24小時或更短時間就足夠了。為了進行準確的分析,在整個實驗過程中觀察完全相同的間隙位置是很重要的。
ibidi的解決方案
ibidi Stage Top Incubation System孵育系統在顯微鏡下提供生理環境,能夠在傷口愈合檢測和遷移檢測過程中對活細胞進行成像。
數據分析
步驟
典型的傷口愈合和遷移實驗產生千兆字節的成像數據,這些數據必須通過手動圖像分析或使用自動化軟件進行進一步處理和分析。在許多實驗裝置中,主要的讀數是傷口閉合的速度。其他可能的讀數是無細胞區域和細胞覆蓋區域的測量值。
ibidi的解決方案
通過Wound Healing FastTrack AI Image Analysis傷口愈合快速跟蹤人工智能圖像分析軟件,ibidi為傷口愈合和遷移分析的定量提供了一個省時、全自動的解決方案。它包括對無細胞區域、細胞覆蓋區域和傷口愈合速度的分析。
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